赛默飞ECL发光液原理 ECL发光
产品简介：WesternLumaxLight系列ECL化学发光底物：一般使用的发光液A和B分别是鲁米诺和过氧化氢，在辣根过氧化物酶（HRP）的催化作用下，鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物，过氧化物不稳定随即分解，形成一种能发光的电子激发中间体，当后者由激发态返回至基态，就会产生荧光.WesternLumaxLight系列ECL化学发光底物ECL发光液概述：ECL是一种化学发光试剂.ECL在化学领域，是一种化学发光试剂!
electrochemiluminescence化学发光试剂，一般是WesternBlot的最后一步，加入1：1的溶液A和溶液B，覆盖pvdf膜，可以显色来观察实验结果。原理：一般使用的发光液A和B分别是鲁米诺和过氧化氢，在辣根过氧化物酶（HRP）的催化作用下，鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物，过氧化物不稳定随即分解，形成一种能发光的电子激发中间体，当后者由激发态返回至基态，就会产生荧光。在发光过程中不需要消耗HRP,HRP只是起催化作用，所以只要HRP没降解失活，是可以重复加发光液的.
Blockmembraneforonehouratroomtemperature(RT).IncubateblotwithprimaryantibodyforonehouratRTwithgentleagitation。WashblotwithPBS-TorTBS-T:1×quickly.1×15min,with0！7ml/cm2membraneeachtime。incubateblotwithsecondaryantibodyforonehouratRTwithgentleagitation.
ECL发光
D、极低丰度的蛋白检测（微量磷酸化、小分子）—同一张膜通过310208/310231相同时间曝光；—310231系列更加完好的灵敏度；—31020310231系列完好搭配，所有难易蛋白轻松检测!做western-blot实验时，选择一款好的发光液对实验的成功很重要，否则很容易发生各种问题，如淬灭，背景高，不灵敏，发光时间短等！比如淬灭，我觉得WesternBlot“淬灭”的原因主要在两方面：含HRP的抗体和发光试剂!
-Perfectperformanceforx-rayfilmimagingandCCDimaging!-Detectingpetagramproteinamounts！-Signalwillbelastto2hours。WESTERNLUMAXLIGHTWesternLumaxLightTMProtocolPrepareyourproteinblotoneitherPVDFornitrocelluloseusingyourstandardtechnique！
)RemovethemembranefromthereagentandplaceitontheprovidedBackgroundquenchingsheet。Drainexcessreagentbyholdingthesheetwiththemembraneverticallyforafewmoments.PlacetheplasticsheetwiththeblotinyourCCDimagerandimage!
WashblotwithPBS-TorPBS-T:3×5min,withanleast0.5ml/cm2membraneeachtime!MixWesternLumaxLightcomponents1:1insufficientamountstoobtainatleast0!1cm/ml2ofyourmembraneandplaceonblotfor2minutes。(Forexample,fora7×9cmblot,mixatleast1mlofeachcomponenttoobtain3mlworkingreagent！
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